生物学实验中常见的实验鼠种类

在阅读文献的时候,我们常常会在experimental model这一栏中看到各种各样的小鼠。
有些常规小鼠看起来还比较熟悉,可有些标记符号一大堆,复杂地令人头皮发麻。
今天,我们就来看一看,paper中那些五花八门的小鼠。
以这篇文章中介绍的小鼠为例,不同模型常常根据不同目的进行杂交配种。
首先最基础的小鼠,C57BL/6,它是一种常见的近交品系实验鼠,我们常听到的 “C57”或者“B6”都是它。
因为该小鼠品系已经完成了基因组测序,且对许多肿瘤不易发,但能够发生饮食诱导性肥胖和动脉粥样硬化等。
所以它常常作为肥胖模型,Ⅱ型糖尿病模型,动脉粥样硬化模型,用于生理学与病理学的相关研究。
重要的是,它也常用于构建基因修饰动物模型,因为可以保证遗传背景上的高度稳定性和实验数据的一致性。
其次为Cre鼠和flox鼠。
Cre为一种酶,因其具有位点特异性,可以使Loxp片段间的基因序列被删除或重组。
因此,Cre与Loxp一起组成Cre-Loxp系统,从而实现在时间和组织上的基因调控表达。
CD4Cre表示CD4基因启动子驱动Cre重组酶表达,又因为在T细胞发育的早期有一个CD4CD8双阳的阶段,所以CD4Cre也可以理解为在T细胞中都能表达Cre酶的实验鼠。
文中Bcl6fl/fl(纯合子)表示在Bcl6序列两端各放置loxp序列,当flox鼠与带细胞特异性表达cre鼠交配繁殖,获得特定细胞目标基因敲除小鼠,即CD4CreBcl6fl/fl表示T细胞Bcl6基因敲除小鼠,一般用于研究Bcl6基因在T细胞发育中的作用。

接下来是TCR转基因小鼠模型,OT-Ⅱ。
该小鼠表达与CD4共受体配对的小鼠α链和β链T细胞受体,对鸡卵白蛋白323-339具有特异性。
在这些小鼠中,外周血CD4/CD8 T细胞比率增加了4倍,主要用于研究CD4+T细胞对抗原反应中的作用。
同理,相对应的是OT-Ⅰ小鼠模型,该小鼠所有外周CD8+T细胞特异性识别由MHC I类分子H-2Kb提呈的卵清蛋白肽:257-264。
主要用于研究CD8+T细胞对抗原反应中的作用。

除了上面提到的条件性敲除小鼠外,全敲小鼠也是在广泛应用。
Tcrbd-/-表示该基因在小鼠全身所有组织和细胞中都不表达。
早期基因敲除主要利用DNA的同源重组原理,通过ES细胞打靶技术,设计同源片段代替靶片段。
近年来随着CRISPER/Cas9的发展,利用CRISPER/Cas9技术能够更快更方便地构建基因敲除小鼠。
主要用于研究目的基因在肿瘤或特殊疾病中的作用。

最后除了基因敲除,基因敲入也是常用的转基因鼠模型。
基因敲入是基于基因重组原理,将外源基因插入生命体基因组中,并使其在体内表达的技术。
包括两种方式,即定点敲入原位敲入
定点敲入指通过插入特定启动子位点来表达外源基因。
原位敲入指在原基因敲除的位点插入新的基因。
 
利用小鼠自身的启动子,在原基因敲除的位点插入新的基因CDS区,一般为引入报告基因以观察启动子表达情况,如GFP。
比如文中的Bcl6-RFP,Foxp3-GFP小鼠根据RFP和GFP荧光来观察Bcl6和Foxp3基因的变化,尤其应用在探究目的基因在一些细胞发育分化过程的追踪上。
在有些文章中,实验鼠配来配去很复杂。
但是万变不离其中,都是根据不同的目的将单一元素的小鼠进行杂交,筛选鉴定最终获得可供实验的小鼠。
通过大量的文献阅读,慢慢积累学习,相信大家再读到Mice Model时,一定能轻松看懂啦。
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