糖水偏好实验细节

糖水偏好实验是利用啮齿动物对甜味的偏好设计而出,用于评估啮齿动物模型的情绪状态的一种动物情绪行为实验。不要高深的技巧,不要高昂的经费,只要糖、水,和你干净的小手,就可以得到可靠的数据。             

反正我没顶住,流着口水将它添加入了我的实验方案,义无反顾跳入了“反正你实验失败原因就出现在方方面面”的大坑

在此,就让我把眼泪擦干,浅析一下糖水偏好实验过程和它的细节处理。(注意糖水偏好实验对于大小鼠的流程略有不同,由于本人只接触过大鼠,以下仅讨论大鼠的糖水偏好实验。)

首先,需要在接到动物后的适应性饲养期,对所有实验动物进行48h的蔗糖饮水训练。即将2瓶1%~2%的蔗糖水放置于笼上,24h后,将其中一瓶蔗糖水用饮用水替代,继续 24h(每隔6h交换两个水瓶的位置)。此后,禁食禁水14h~23h,在笼上放置两瓶水,其中一瓶为1%~2%蔗糖水,一瓶为饮用水。供大鼠1h内自由饮用两瓶不同的水,30min 后,交换两瓶的位置。测定1h内大鼠对两瓶的饮水量。在此后的糖水偏好测试时,均采用此方法,即禁水 14h~23h 后,进行糖水偏好测验,测验完成后,放回笼中饲养。采用蔗糖偏嗜度作为评价指标,即蔗糖偏嗜度(%)=蔗糖水饮用量+饮用水饮用量)×100%。抑郁行为判断标准:蔗糖偏嗜度低于0.4或者与对照组相比有显著性降低(P<0.05)(摘自 T CALAS 75-2019实验动物 小鼠和大鼠情绪行为实验规范)

简单来说,这个实验的细节体现在饮水瓶装置和实验动物两个方面。

饮水瓶装置

1)提前准备好蔗糖。特意强调这个是因为如果不常做这个实验,满实验室找不到蔗糖的情况也是有的。临到要用发现没蔗糖,哦嚯,完蛋。

2)准备与实验动物相等的饲养小鼠的笼子,两倍多的小水瓶、瓶塞。在使用前最好检查水瓶和瓶塞是否完好,会不会漏水。如果水瓶和瓶塞坑坑洼洼就不要用了,不然大鼠喝水,大鼠脚下的垫料也一起帮着喝水,实验数据就不准确。

3)准备体重秤。虽然实验规范写明,在饮水瓶里盛装的液体体积,大鼠应不少于50ml。使用的单位是ml,但在实际过程中用量筒难以精准测量实际体积。如果大鼠没有很爱喝某一瓶水,算上挂壁的损耗,做完实验再次估读变化的结果可能就是没有变化。

4)做完实验测定饮水量时,如果使用的是一个固定的容器,一定要记得把容器内的水擦干净或者甩干净。残留的水看着不多,但其实很干扰实验结果。省掉这一步,残留的水多了,配合第三步不精准的估量,有机会得到动物喝完水还变多了的喜人结果。

实验动物:

1)糖水偏好实验必须单笼饲养时检测,才能区分个体差异。如果有实验动物在这之前是分组合笼饲养的,需要提前48-72h将动物单笼饲养,使动物能适应环境。贸然把大鼠放进去,你可能会欣喜的发现,结果层次不齐,该抑郁的动物没有抑郁,不该抑郁的动物反而抑郁了。

2)水瓶位置定期更换是为了消除动物的单侧偏爱。

3)蔗糖有热量,在实验前应该尽量保证动物的饥饿程度是一样的。如果不一样,饥饿的动物出于对热量的偏爱可能会喝更多的糖水,影响实验。(有的实验造模给动物禁食过久,让动物非常饥饿,动物会疯狂喝糖水。)

4)动物对蔗糖的偏爱程度存在品系间差异和性别差异,有的动物对1%浓度的蔗糖敏感,有的动物不敏感,需要摸索条件。摸索条件时要重新训练一次,否则可能还是做不出差异。

5)行为学检测之前要想好时间,不能过于折腾老鼠。在糖水偏好实验前动物体力消耗太多,在实验时动物会倾向于睡觉而不是喝水。

在我的实验探索过程中,由于实验条件有限,而且是新做的实验没有师兄师姐带,走了不少弯路。但头铁多磨几次、多查文献,几番下来掌握这些细节还是做出了能看的结果。我想,对于做实验的人来说,能完整地按要求做完实验,将个人努力发挥到极致,只待动物发挥,将空白组与模型组的差异做出来,就足以。

特此记录,与君共勉。

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